Микробиологический анализ воды

Микробиологический анализ воды

Наша лаборатория проводит микробиологический анализ воды юридическим лицам по программе производственного контроля или при вводе объекта строительства в эксплуатацию и физическим лицам, при необходимости определения безопасности воды в эпидемическом отношении.

Лабораторные исследования выдаются в виде протоколов испытаний и экспертных заключений. Возможен срочный выезд на объект для взятия проб и проведения лабораторных исследований воды.

Проводим микробиологический анализ воды:

  • из систем централизованного водоснабжения холодной и горячей;
  • нецентрализованного водоснабжения: из колодцев, скважин, каптажей родников;
  • бассейнов;
  • сточных вод, сбрасываемых в водные объекты первой и второй категорий водопользования;
  • водных объектов питьевого, хозяйственно-бытового и рекреационного водопользования.

Наша лаборатория определяет:

  • Наличие термотолерантных колиформных бактерий (ТКБ);
  • Наличие общих колиформных бактерий (ОКБ);
  • Общее микробное число (ОМЧ);
  • Наличие колифагов. При обнаружении колифагов вода исследуется и на присутствие вирусов;
  • Наличие спор сульфитредуцирующих клостридий;
  • Наличие возбудителей кишечных инфекций;
  • Наличие золотистого стафилококка и др.

Для оценки эффективности мер по обеспечению качества воды контрольные пробы воды могут исследоваться не только по основным, но и дополнительным микробиологическим, а также паразитологическим показателям.

Для каждого вида воды существует определенная комбинация из данных параметров.

Проконсультируйтесь с нашими санитарными врачами по данному вопросу. Такие консультации проводятся по телефону +7 (812) 441-37-68, а также при личном обращении. Возможен выезд специалиста на объект для проведения консультации.

Микробиологическое загрязнение воды может производиться сточными водами из-за фильтрации через грунт содержимого негерметичных септиков, выгребных ям, прорывов и нарушения целостности городской канализации, выделений человеком и животными отходов жизнедеятельности. Таким образом в питьевую воду могут поступать возбудители кишечных инфекций, яйца и цисты гельминтов, вирусы. При употреблении такой воды в питьевых целях развиваются заболевания от легких до тяжелых и летальных форм.


Считается нецелесообразным исследование питьевой воды на присутствие каждого из огромного множества патогенных агентов. Поэтому был общепризнан метод обнаружения в питьевой воде микроорганизмов, относящихся к условно патогенной микрофлоре и так называемых индикаторов фекального загрязнения. Присутствие в питьевой воде таких «индикаторов» может говорить и о загрязнении воды уже кишечной патогенной микрофлорой.

Микробиологическое исследование воды осуществляется нашими специалистами лаборатории согласно требованиям санитарного законодательства (СанПиН 2.1.4.1074-01, СанПиН 2.1.4.1175-02).

Полезная информация:

Через воду бассейнов могут передаваться следующие заболевания: гепатит А, дизентерия, отиты, синуситы, конъюнктивиты, туберкулез кожи, а также лямблиоз, трахома, гонорейный вульвовагинит и другие не менее серьезные заболевания.

* Цены указаны за одну единицу исследования. Для уточнения стоимости и получения скидок обращайтесь по телефону: +7 (812) 441-37-68

www.sezspb.ru

Микробиологический анализ питьевой воды

Специалисты выполняют анализ воды из различных источников. Мы проанализируем качество воды в любом интересующем вас источнике.

Стоимость анализа воды


Количество показателей Стоимость (рублей)
Микробиологический (3 показателя) 6000
Химический (15 показателей) 8000
Химический + микробиологический (18 показателей) 10000
Расширенный химический (33 показателя) 16000
Расширенный химический + микробиологический (36 показателей) 18000

Анализ воды из скважин и колодцев

Для самостоятельной сдачи воды из скважины необходимо заранее предупредить лабораторию по телефону +7 (495) 135-20-50

Зачем нужен санитарно-микробиологический анализ воды

Какую воду я пью? Очень немногих интересует этот вопрос, и зря, потому что некачественная вода – прямой путь к развитию хронических заболеваний. Из патогенных микроорганизмов, представляющих опасность для здоровья человека, можно выделить следующие:

Проверка воды на качество в Москве осуществляется согласно санитарным правилам и нормам (СанПиН):

Все эти патогенные микроорганизмы могут сдержаться в воде, которую вы пьете. Профессиональный санитарно-микробиологический анализ питьевой воды поможет вам выявить микроорганизмы, представляющие угрозу.

Микробиологический и химический анализ воды

При желании дополнительно с микробиологическим вы можете выполнить и химический анализ воды. В отличие от микробиологического исследования, объектом внимания данного анализа являются различные химические загрязнений.

Специалисты предлагают вам три варианта химического анализа воды:

Мышьяк, тяжелые металлы, свинец, формальдегид, фенол, излишняя или недостаточная минерализация воды – причины, по которым вода может быть опасной для вашего здоровья.

Анализ воды в лаборатории


Наши специалисты могут предложить вам следующие варианты анализа воды:

Как выполнить высокоточный анализ воды в нашей современной лаборатории:

Комментариев еще нет. Будьте первыми!

Ваш комментарий будет опубликован после проверки модератором.

dezinfektsiya-moskow.ru

Исследуемые показатели:

 

1. Общее микробное число, КОЕ/мл
2. Термотолерантные колиформы, КОЕ/100 мл
3. Бактерии группы кишечной палочки, КОЕ/100 мл

 

Микробиологический анализ воды


 

Зачем проводится микробиологический анализ воды? Задачу стандартного бактериологического анализа можно сформулировать следующим образом: оценка степени вероятности загрязнения питьевой воды патогенными микроорганизмами, которые могут вызывать различные инфекционные заболевания.

Как правило, вместе с патогенными организмами в воду попадают и другие, менее опасные бактерии и вирусы. При этом условно-патогенных и вовсе безвредных организмов в воде значительно больше, а потому и обнаружить их лабораторными методами гораздо проще. Эти бактерии являются своего рода «индикаторными организмами», и именно их выявление является основной задачей при микробиологическом анализе воды.

 

Если в пробах воды нет даже широко распространенных организмов, значит, уровень ее загрязнения минимален, и вероятность присутствия в воде патогенных организмов стремится к нулю. Если же индикаторные организмы обнаружены в больших количествах, значит, велика вероятность фекального загрязнения источника воды и, соответственно, велик риск присутствия патогенных агентов. Согласно последним рекомендациям ВОЗ, в питьевой воде индикаторных организмов быть не должно!

 

Основные микробиологические показатели

 

1. Общее микробное число. От теории переходим к практической части. Какие методы позволяют определить степень загрязнения воды индикаторными микроорганизмами? Основным показателем, принятым во многих странах, является «общее микробное число». Показатель отражает количество бактерий, образующих колонии (КОЕ), в единице объема воды (в 1мл).


Чтобы суть метода стала ясна, расскажем о методике определения ОМЧ подробнее. Определенный объем воды пропускается через фильтр. Диаметр отверстий фильтра не превышает 0,45 микрометра, а потому на нем оседают все имеющиеся в воде бактерии.

После фильтрации исследуемый материал (мембрану с бактериями) помещают на питательную среду при определенной температуре (22-37 градусов) и выдерживают в течение 24-72 часов. Во время этого инкубационного периода бактерии, которые были в воде, дают начало колониям, и эти колонии видны на питательной среде невооруженным глазом. Подсчитав число колоний, мы получаем общее микробное число воды, выраженное в колониеобразующих единицах. Как видим, все предельно просто.

Согласно санитарно-гигиеническим нормативам, принятым в Российской Федерации, данный показатель не должен превышать 50 единиц. Однако Всемирная Организация Здравоохранения в своих рекомендациях куда более категорична – колониеобразующим единицам в питьевой воде не место!

Высокий показатель ОМЧ свидетельствует о сильной бактериальной загрязненности и указывает на высокую вероятность присутствия в воде патогенных микроорганизмов. В этом случае нам не обойтись без дополнительных показателей, о которых пойдет речь далее.


 

2. Общие колиформы. Что такое колиформы? Это грамотрицательные микроорганизмы, которые в норме живут и размножаются в кишечнике человека, животных и даже птиц, а во внешнюю среду попадают с фекальными массами. В отличие от ОМЧ, колиформные бактерии можно считать более специфическим индикатором фекального загрязнения.

Останавливаться на методологии мы больше не будем, а сразу переходим к оценке результатов. Наши санитарно-гигиенические службы в этом вопросе полностью согласны с ВОЗ – в норме в питьевой воде колиформных бактерий быть не должно. Есть некоторые детали, касающиеся оценки результатов (в частности, в 5 % проб они могут обнаруживаться), но это не меняет сути дела – наличие в воде колиформ говорит либо о недостаточной очистке воды, либо о вторичном фекальном загрязнении уже после очистки. Использование такой воды для питья чревато проблемами со здоровьем (какими – ниже по тексту).

3. E.coli, или выявление термотолерантных колиформ. Третий базовый показатель качества воды. Упустив некоторые научные детали, этот метод можно упрощенно назвать более точной и чувствительной модификацией предыдущего. Основан он на выявлении в воде кишечной палочки (E. coli) — микроорганизма, который живет в толстом кишечнике человека и животных. Многие штаммы кишечной палочки являются возбудителями инфекционных заболеваний.

Метод верификации E. coliявляется дорогостоящим, а потому принято определять не саму кишечную палочку, а общее количество, так называемых, термотолерантных колиформ (устойчивых к действию высоких температур), которое всегда соответствует уровню колонизации воды E. coli. Что до оценки результатов, то здесь нет места компромиссам – в питьевой воде количество термотолерантных колиформ должно быть равно абсолютному нулю!


 

Прямые и скрытые угрозы

 

О чем нам могут рассказать данные микробиологического анализа? Во-первых, кишечная палочка сама по себе может стать причиной инфекционной патологии (эшерихиоз, диарея, энтерит), которая сопровождается клиникой острого кишечного заболевания.

Расстройство стула, тошнота и рвота, повышение температуры тела, невероятная слабость и упадок сил – типичные симптомы кишечной инфекции. Взрослые часто выздоравливают без вмешательства инфекционистов, но в случае с детьми все гораздо серьезнее. Диарея и рвота быстро приводят к обезвоживанию, которое является угрожающим жизни состоянием и требует проведения терапии в реанимационном отделении инфекционной больницы.

Во-вторых, не будем забывать, что кишечная палочка – это лишь индикатор фекального загрязнения воды. Индикатор, который сигнализирует о высокой вероятности наличия в воде других патогенных микроорганизмов. Пришло время рассказать, что именно может незримо присутствовать в воде, в которой обнаружены признаки фекального загрязнения?

Вода может быть инфицирована патогенными бактериями. Синегнойная палочка, иерсинии, энтерококки (возбудитель энтерита), сальмонеллы, шигеллы (возбудитель дизентерии) и даже холерный вибрион (возбудитель холеры)  – все эти микроорганизмы могут присутствовать в зараженной воде. Вспомним и о вирусах – вирус гепатита А и энтеровирусы очень часто передаются фекально-оральным путем, а именно – посредством зараженной воды.


Не будем забывать и о царстве простейших. Через загрязненную воду можно заразиться лямблиозом (возбудитель – кишечная лямблия), балантидиазом (возбудитель – инфузория Balantidium coli) и другими кишечными инфекциями. Наконец, яйца гельминтов нередко попадают в наш организм через неочищенную питьевую воду. Заметим, что мы вспомнили далеко не все недуги, передающиеся с водой, но даже этот неполный список заставляет другими глазами посмотреть на значение микробиологического анализа воды.

На секунду вернемся к началу статьи. Вы помните, мы говорили о том, что микробиологическое исследование «оценивает вероятность», так как провести исчерпывающий анализ воды невозможно. Только что мы пояснили причину подобного утверждения — патогенных микроорганизмов так много, что полный набор тестов потребовал бы колоссальных средств и нечеловеческих усилий.

Но какие меры предпринимаются при подозрении на выраженное фекальное загрязнение питьевой воды? В этом случае производится анализ качества воды по дополнительным показателями: определяется количество фекальных стрептококков, сульфитредуцирующих клостридий, колифагов (индикатор присутствия вирусов в воде) etc.


Фекальные стрептококки во внешней среде живут недолго, а потому косвенно указывают на недавнее, «свежее» заражение, а вот сульфитредуцирующие клостридии, напротив, очень долго сохраняются в воде и свидетельствуют о большом сроке заражения. Кроме того, косвенно клостридии указывают на наличие в воде и простейших микроорганизмов.

Прицельное исследование воды проводится и при появлении вспышек инфекционных заболеваний. В частности, каждый из нас слышал или читал в СМИ о сезонных вспышках холеры в различных регионах страны. В подобных ситуациях и выполняется целенаправленное исследование воды (в данном случае — в водоемах) на наличие холерного вибриона.

 

Методика отбора пробы воды

 

Осталось дело за малым – правильно отобрать воду для анализа. Самый простой путь — воспользоваться услугами лаборанта. К вам на объект приедет специалист, который по всем правилам отберет образцы питьевой воды и без промедления доставит их в лабораторию.

Второй вариант – выполнить забор воды самостоятельно. Как это сделать? Первым делом обратитесь в лабораторию и получите там стерильную стеклянную (!) лабораторную колбу. Вернувшись домой, обожгите пламенем водопроводный кран, обработайте его спиртом и пролейте воду сильной струей в течение 10 минут. Лишь после приступайте к  отбору образца воды. Набрав полную колбу (объем не менее 500 мл), вы должны закрыть сосуд стерильной пробкой. Сдать пробу в лабораторию следует в тот же день.

www.watermap.ru

Вода является естественной средой обитания многих микробов. Основная масса микробов поступает из почвы. Количество микробов в 1 мл воды зависит от наличия в ней питательных веществ. Чем вода сильнее загрязнена органическими остатками, тем больше в ней микробов. Наиболее частыми являются воды глубоких артезианских скважин, а также родниковые воды. Обычно они не содержат микробов. Особенно богаты микробами открытые водоемы и реки. Наибольшее количество микробов в них находится в поверхностных слоях (в слое 10 см от поверхности воды) прибрежных зон. С удалением от берега и увеличением глубины количество микробов уменьшается. В чистой воде находится 100— 200 микробных клеток в 1 мл, а в загрязненной — 100— 300 тыс. и больше.

Реки в районах городов часто являются естественными приемниками стоков хозяйственных и фекальных нечистот, поэтому в черте населенных пунктов резко увеличивается количество микробов. Но по мере удаления реки от города число микробов постепенно уменьшается, и через 3—4 десятка километров снова приближается к исходной величине. Это самоочищение воды зависит от ряда факторов: механическое осаждение микробных тел, уменьшение в воде питательных веществ, усвояемых микробами, действие прямых лучей солнца, пожирание бактерий простейшими и др.

Если считать, что бактериальная клетка имеет объем 1 мк3, то при содержании их в количестве 1000 клеток в 1 мл, получится около тонны живой бактериальной массы в кубическом километре воды. Такая масса бактерий осуществляет различные превращения в круговороте веществ в водоемах и является начальным звеном в пищевой цепи питания рыб.

Патогенные микробы попадают в реки и водоемы со сточными водами. Возбудители таких кишечных инфекций, как брюшной тиф, паратифы, дизентерия, холера и др., могут сохраняться в воде длительное время. В этом случае вода становится источником инфекционных заболеваний.

Особенно опасно попадание болезнетворных микробов в водопроводную сеть. Поэтому за состоянием водоемов и подаваемой из них водопроводной воды установлен сани-тарно-бактериологический контроль.

Санитарно-микробиологическнй анализ питьевой

Отбор пробы воды

Для отбора проб воды используют специально предназначенную для этих целей одноразовую посуду или емкости многократного применения, изготовленные из материалов, не влияющих на жизнедеятельность микроорганизмов. Емкости должны быть оснащены плотно закрывающимися (силиконовыми, резиновыми или из других материалов) пробками и защитным колпачком (из алюминиевой фольги, плотной бумаги). Многоразовая посуда, в том числе пробки, должны выдерживать стерилизацию сухим жаром или автокла-вированием.

Пробу отбирают в стерильные емкости с соблюдением правил стерильности. Емкость открывают непосредственно перед отбором, удаляя пробку вместе со стерильным колпачком. Во время отбора пробка и края емкости не должны чего-либо касаться. Ополаскивать посуду запрещается.

При исследовании воды из распределительных сетей отбор проб из крана производят после предварительной его стерилизации обжиганием и последующего спуска воды не менее 10 минут при полностью открытом кране. Если отбирают воду после обеззараживания химическими реагентами, то для нейтрализации остаточного количества дезинфектан-та в емкость, предназначенную для отбора проб, до стерилизации вносят натрий серноватистокислый в виде кристаллов или концентрированного раствора из расчета 10 мг на 500 мл воды.

После наполнения емкость закрывают стерильной пробкой и колпачком. Отобранную пробу маркируют и сопровождают актом отбора проб воды с указанием названием пробы, места забора, даты (год, месяц, число, час), цель исследования, куда направляется проба для исследования, подпись лица, взявшего пробу.

Безопасность питьевой воды по эпидемиологическим показателям (по СанПиНу 2.1.4.559-96)

Показатели

Единицы измерения

Нормативы

Термотолерантные колиформные бактерии

Число бактерий в 100 мл

Отсутствие

Общие колиформные бактерии

Число бактерий в 100 мл

Отсутствие

Общее микробное число

Число образующих колоний бактерий в 1 мл

Не более 50

Колифаги

Число бляшкообразую-щих единиц в 100 мл

Отсутствие

Споры сульфитреду-цирующих клост-ридий

Число спор в 20 мл

Отсутствие

Цисты лямблий

Число цист в 50 мл

Отсутствие

Хранение и транспортировка проб воды

К исследованию проб в лаборатории необходимо приступить как можно быстрее с момента отбора.

Доставка проб осуществляется в контейнерах-холодильниках при температуре 4—10°С. В холодный период года контейнеры должны быть снабжены термоизолирующими материалами, обеспечивающими предохранение проб от промерзания. При соблюдении указанных условий срок начала исследований от момента отбора проб не должен превышать 6 часов.

Если пробы нельзя охладить, их анализ следует провести в течение 2 часов после забора.

При несоблюдении времени доставки пробы и температуры хранения анализ проводить не следует.

Подготовка посуды к анализу

Лабораторная посуда должна быть тщательно вымыта, ополоснута дистиллированной водой до полного удаления моющих средств и других посторонних примесей и высушена.

Пробирки, колбы, бутылки, флаконы должны быть заткнуты силиконовыми или ватно-марлевыми пробками и упа — кованы так, чтобы исключить загрязнение после стерилизации в процессе работы и хранения. Колпачки могут быть металлические, силиконовые, из фольги или плотной бумаги.

Новые резиновые пробки кипятят в 2%-м растворе натрия двууглекислого 30 минут и 5 раз промывают водопроводной водой (кипячение и промывание повторяют дважды). Затем пробки 30 минут кипятят в дистиллированной воде, высушивают, заворачивают в бумагу или фольгу и стерилизуют в паровом стерилизаторе. Резиновые пробки, использованные ранее, обеззараживают, кипятят 30 минут в водопроводной воде с нейтральным моющим средством, промывают в водопроводной воде, высушивают, монтируют и стерилизуют.

Пипетки со вставленными тампонами из ваты должны быть уложены в металлические пеналы или завернуты в бумагу.

Чашки Петри в закрытом состоянии должны быть уложены в металлические пеналы или завернуты в бумагу.

Подготовленную посуду стерилизуют в сухожаровом шкафу при 160—170°С 1 час, считая с момента достижения указанной температуры. Простерилизованную посуду можно вынимать из сушильного шкафа только после его охлаждения ниже 60°С.

После выполнения анализа все использованные чашки и пробирки обеззараживают в автоклаве при (126 ± 2)°С 60 минут. Пипетки обеззараживают кипячением в 2%-м растворе NaHC03.

После охлаждения удаляют остатки сред, затем чашки и пробирки замачивают, кипятят в водопроводной воде и моют с последующим ополаскиванием дистиллированной водой.

Подготовка проб воды

Прежде чем приступить к посеву, пробу необходимо тщательно перемешать и обработать горящим тампоном край емкости с тем, чтобы устранить его возможное загрязнение во время транспортирования. На используемых для посева пробирках и чашках необходимо обозначить номер пробы, объем воды или разбавление, дату посева.

Перед каждым отбором новой порции воды для анализа пробу необходимо перемешать стерильной пипеткой.

Определение колиформных бактерий в воде методом мембранных фильтров

Фильтровальный аппарат обтирают ватным тампоном, смоченным спиртом, и фламбируют. После охлаждения на нижнюю часть фильтровального аппарата (столик) фламби-рованным пинцетом кладут стерильный мембранный фильтр, прижимают его верхней частью прибора (стаканом, воронкой) и закрепляют устройством, предусмотренным конструкцией прибора.

В верхнюю часть прибора наливают точно отмеренный объем воды, затем создают вакуум в нижней части прибора.

При фильтровании 1 мл исследуемой воды или ее разбавлении в воронку предварительно следует налить не менее 10 мл стерильной водопроводной воды, а затем внести анализируемую воду.

После окончания фильтрования воронку снимают, флам-бированным пинцетом фильтр осторожно приподнимают за край при сохранении вакуума для удаления излишка воды на нижней стороне фильтра, а затем переносят его, не переворачивая, на питательную среду, разлитую в чашки Петри, избегая пузырьков воздуха между средой и фильтром. Поверхность фильтра с осевшими на ней бактериями должна быть обращена вверх.

На одну чашку можно поместить 3—4 фильтра с условием, чтобы фильтры не соприкасались.

Выполнение анализа

При исследовании воды на выходе с водопроводных сооружений и в распределительной сети необходимо анализировать 3 объема по 100 мл. Точно отмеренный объем воды фильтруют через мембранные фильтры с соблюдением вышеуказанных требований.

Фильтры помещают на среду Эндо, ставят в термостат вверх дном и инкубируют посевы при температуре (37 + 1)°С в течение 24 + 2 часов.

Учет результатов

Результат считается отрицательным, если на фильтрах вообще не выросли колонии или выросли колонии с неровными краями и поверхностью (пленчатые, губчатые, плесневые, прозрачные, слизистые).

При сливном росте на всех фильтрах проводят рассев на среде Эндо для получения изолированных колоний обычными бактериологическими методами.

При наличии типичных лактозоположительных колоний, дающих отпечаток на обратной стороне мембранного фильтра и среде — темно-красных, красные с металлическим блеском и без него, а также лактозоотрицательных — розовых без отпечатков, подсчитывают число колоний каждого типа.

Для идентификации отбирают не менее 5 колоний каждого вида, делают их посев на скошенный агар и далее изучают биохимические тесты. В качестве подтверждающих используют оксидазный тест и тест образования кислоты и газа при ферментации лактозы или маннита (глюкозы).

Для определения оксвдазной активности на фильтровальную бумагу надо поместить 2—3 капли свежеприготовленного реактива для океидазного теста. Заранее приготовленные бумажки смачивают дистиллированной водой. Стеклянной палочкой помещают мазок свежей культуры на подготовленную бумагу. Реакция считается положительной, если в течение 10—30 с появляется фиолетово-коричневое или синее окрашивание.

Культуры, давшие оксидазоположительные реакции, дальнейшему исследованию не подлежат, так как к общим колиформным бактериям относятся грамотрицательные, не образующие спор палочки, не обладающие оксидазной активностью, ферментирующие лактозу или маннит с образованием альдегида, кислоты и газа при температуре 37°С в течение 24 часов.

Термотолерантные колиформные бактерии являются показателями свежего фекального загрязнения и обладают всеми признаками общих колиформных бактерий, которые кроме того способны ферментировать лактозу до кислоты и газа при температуре 44°С в течение 24 часов.

Все типичные лактозоположительные колонии засевают в подтверждающие среды с лактозой и маннитом и инкубируют в течение 24 часов при температуре 37 °С для определения общих колиформных бактерий.

Для определения термотолерантных бактерий посев производят в среду, предварительно прогретую до температуры 44 °С, и инкубируют при этой же температуре в течение 24 часов.

Колонии учитывают как общие колиформные бактерии при отрицательном оксидазном тесте, ферментации лактозы или маннита (глюкозы) при температуре 37°С с образованием кислоты и газа. Среди этих колоний учитывают как термотолерантные колиформные бактерии при оксидазном тесте и ферментации лактозы при температуре 44 °С с образованием кислоты и газа.

Если при выборочной проверке колоний одного типа получены неодинаковые результаты, то для вычисления числа колиформных бактерий среди этих колоний используют формулу:

где х — число колоний одного типа; а — общее число колоний этого типа; b — число проверенных из них; с — число колоний с положительным результатом.

Вычисление и представление результатов

Результат анализа выражают числом колоний образующих единиц (КОЕ) общих колиформных бактерий в 100 мл воды. Для подсчета результата суммируют число колоний, подтвержденных как общие колиформные бактерии, выросших на всех фильтрах, и делят на 3.

Примеры. При посеве трех фильтров по 100 мл выросло две колонии на одном, на остальных двух фильтрах нет роста. Число общих колиформных бактерий будет: 2:3 = = 0,7 КОЕ в 100 мл.

Определение общего числа микроорганизмов, образующих колонии на питательном агаре

Метод определяет в питьевой воде общее число мезо-фильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (ОМЧ), способных образовывать колонии на питательном агаре при температуре 37°С в течение 24 часов, видимые с увеличением в 2 раза.

Выполнение анализа

Из каждой пробы отобранной воды должен быть сделан посев не менее двух объемов по 1 мл. После тщательного перемешивания пробы воды вносят по 1 мл в стерильные чашки Петри, сразу же в каждую чашку вливают 6—8 мл расплавленного и остуженного до 45—46°С питательного агара. Затем смешивают содержимое чашек, равномерно распределяя по всему дну, избегая образования пузырьков воздуха, попадания агара на края и крышку чашки.

После застывания агара чашки с посевами помещают в термостат при температуре 37 °С на 24 часа.

Вычисление и представление результатов

Должны быть подсчитаны все выросшие на чашке колонии, наблюдаемые при увеличении в 2 раза. Подсчет следует производить только на тех чашках, на которых выросло не более 300 изолированных колоний.

Подсчитанное количество колоний на каждой чашке суммируют и делят на два. Результат выражают числом колоний образующих единиц (КОЕ) в 1 мл исследуемой пробы воды.

Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий титрационным методом

Титрационный метод может быть использован:

при отсутствии материалов и оборудования, необходимых для выполнения анализа методом мембранной фильтрации; при анализе воды с большим содержанием взвешенных веществ;

* в случае преобладания в воде посторонней микрофлоры, препятствующей получению на фильтрах изолированных колоний общих колиформных бактерий.

Выполнение анализа

При исследовании питьевой воды централизованного водоснабжения засевают 3 объема по 100 мл (анализ качественный). При исследованиях воды с целью количественного определения общих колиформных бактерий и при повторном анализе производят посев: 3 объемов по 100 мл, 3 объемов по 10 мл, 3 объемов по 1 мл. Каждый объем исследуемой воды засевают в лактозо-пептонную среду. Посев 100 мл и 10 мл воды производят в 10 и 1 мл концентрированной лак-тозо-пептонной среды, посев 1 мл пробы проводят в 10 мл среды обычной концентрации.

Посевы инкубируют при температуре 37° С в течение 24— 48 часов. После 24 часов инкубации проводят предварительную оценку посевов. Из емкостей, где отмечено наличие роста и образование газа, производят высев на сектора типичных для лактозоположительных бактерий колоний, дают положительный ответ на присутствие общих колиформных бактерий.

Вычисление результатов

При исследовании трех объемов по 100мл результаты оцениваются качественно, и при обнаружении общих или термотолерантных колиформных бактерий хотя бы в одном из трех объемов делают запись в протоколе «обнаружены» в 100 мл.

При исследовании количественным методом, после определения положительных и отрицательных результатов на наличие общих и термотолерантных колиформных бактерий в объемах воды, посеянных в среду накопления, вычисляют наиболее вероятное число бактерий в 100 мл пробы (таблица).

Расчет наиболее вероятного числа бактерий в 100 мл питьевой воды

Определение колифагов прямым методом

Проведение анализа

Накануне проведения анализа необходимо сделать посев Е. coli на косяк с питательным агаром.

Перед проведением анализа сделать смыв бактерий с этого косяка 5 мл стерильной водопроводной воды и по стандарту мутности приготовить взвесь Е, coli в концентрации 109 бактериальных клеток в 1 мл.

Расплавить и остудить до 45°С 2%-и питательный агар.

Исследуемую воду (100 мл) внести в 5 стерильных чашек Петри по 20 мл в каждую. В питательный агар добавить смыв Е. coli из расчета 1,5 мл смыва бактерий на 150 мл агара и осторожно перемешать. Полученной смесью по 30 мл залить сначала пустую чашку Петри (контроль газона Е. coli), а затем все чашки, содержащие исследуемую воду. Содержимое чашек осторожно перемешать. Чашки оставить при комнатной температуре для застывания, а затем вверх дном поместить в термостат для инкубирования при температуре 37°С.

Учет результатов

Учет результатов проводят путем подсчета и суммирования бляшек, выросших на 5 чашках Петри. Результаты выражают в бляшкообразующих единицах (БОЕ) на 100 мл пробы воды. В контрольной чашке бляшки колифагов должны отсутствовать.

Для проведения текущего контроля качества питьевой воды используют метод определения колифагов.

Колифаги — бактериальные вирусы, способные лизиро-вать Е. coli и формировать при температуре 37 + 1°С через 18 + 2 г зоны лизиса бактериального газона (бляшки) на питательном агаре.

Исследуемую пробу воды (100 мл) и чашку Петри с контролем Е. coli помещают в термостат на 18—20 часов при температуре 37 + 1°С.

Для контроля культуры 0,1 мл смыва бактерий Е. coli (или 0,2 мл 4-часовой бульонной культуры) помещают в чашку Петри и заливают питательным агаром.

После инкубации из исследуемой пробы воды в пробирку отливают 10 мл и добавляют 1 мл хлороформа. Пробирку закрывают стерильной резиновой или силиконовой пробкой, энергично встряхивают и оставляют при комнатной температуре не менее 15 мин до полного осаждения хлороформа.

В предварительно расплавленный и остуженный до 45— 49° С питательный агар добавляют приготовленный смыв бактерий Е. coli из расчета 1,0 мл смыва на 100 мл агара,

В стерильную чашку Петри пипеткой из пробирки переносят 1 мл обработанной хлороформом пробы и заливают смесью расплавленного и остуженного до 45—49°С питательного агара объемом 12—15 мл, а также одну дополнительную чашку Петри для контроля культуры Е. coli, перемешивают и оставляют на столе до полного застывания агара, затем чашки Петри ставят в термостат на 18 + 2 ч при 37°С.

Учет результатов

Просмотр посевов осуществляют в проходящем свете. Проба считается положительной при наличии полного лизиса, просветления нескольких бляшек, одной бляшки на чашке с пробой воды при отсутствии зон лизиса на контрольной чашке. При наличии зон лизиса в контроле — результат считается недействительным.

mikrobiki.ru

Самой чистой будет считаться вода, добытая из глубоководной артезианской скважины. Она или вовсе лишена загрязнителей бактериологического типа, или содержит небольшое количество загрязнителей, которые не несут в себе никакой опасности здоровью и жизни потребителя.

Артезианскую скважину можно по праву назвать стерильной. Особенно если сравнивать ее с иными источниками питьевой воды. Самыми опасными в плане повышенного уровня загрязненности считаются поверхностные воды.

Именно по этой причине можно говорить о том, что степень загрязнения источника питьевой воды выше, если глубина скважины минимальна. Для обеспечения загородного дома высококачественной питьевой водой следует провести профессиональное, грамотное бурение и оборудование артезианской глубоководной скважины.

Неукоснительное соблюдение абсолютно всех имеющихся и установленных технологических стандартов бурения, монтажа, устройства и последующего использования источника воды опасность бактериологического загрязнения питьевой воды минимальна и практически сводится к нулю.

Но в случае неправильного подхода и неправильно подобранного технического оборудования для артезианской скважины даже ее глубокое залегание не будет являться гарантией того, что в нее не попадут грунтовые и поверхностные воды, которые содержат микробиологические загрязнители.

Почему происходит заражение воды

artezianskaya skvazhinaОсновными причинами, по которым происходит заражение питьевой воды, добываемой из артезианской скважины, могут быть:

  • ненадлежащего качества трубы для обсадки;
  • плохо проведенные работы, связанные со сваркой труб, осуществлением резьбы, соединяющей эти трубы;
  • неправильно проведенная герметизация пространства за обсадными трубами;
  • попадание поверхностных вод в скважину в момент ее бурения.

Если есть хотя бы малейшие подозрения на наличие причин, по которым вода может быть загрязнена, следует обязательно провести санитарно-микробиологический анализ питьевой воды.

Эффективность фильтров будет достигнута только в том случае, если параметры загрязнителей, находящихся в артезианской воде, имеют постоянные значения.

Именно по этой причине необходимо в обязательном порядке ежегодно сдавать артезианскую воду на микробиологический анализ, который проводится в соответствии с установленными санитарно-эпидемиологическими нормами.

В случае даже незначительных изменений химического состава воды важно провести перенастройку фильтрационной системы во избежание ухудшения водоочистки.

Вода на пробу: правила ее забора из водоисточника

Процесс забора воды для проведения микробиологического анализа достаточно специфический. Взять правильно образец воды на микроанализ сложнее, чем на химический. Правильный забор пробы артезианской воды подразумевает следующие действия:

  1. Чтобы доставить воду в лабораторию с целью проведения бактериологического анализа, необходимо брать исключительно стерильную посуду, объем которой не менее 500 грамм. Стерильные емкости можно взять прямо в лаборатории, где в последующем будет осуществляться микробиологический анализ питьевой воды. Можно, в принципе, самостоятельно простерилизовать емкость, прокипятив ее в течение пяти-семи минут, или обработав паром. Можно для этих целей использовать духовой шкаф, где емкость должна находиться в течение 10-15 минут при температуре 180 градусов.
  2. Перед тем, как взять воду из водопроводной системы, необходимо в обязательном порядке обработать кран открытым огнем, затем тщательно протереть спиртом. Воду следует спустить, открыв на максимально возможную мощность кран и спускать воду приблизительно 5-7 минут и лишь после этого произвести забор воды в пастеризованную емкость. Категорически запрещено дотрагиваться до крышки, которой будет закрыта тара, и до горловины.
  3. Отвезти жидкость в лабораторию, где будет проведено исследование, необходимо в течение нескольких часов. Если сделать это в столь короткий срок по ряду причин невозможно, емкость с водой можно поставить в холодное место на 2-3 часа, плотно закрыв крышкой, после чего отвезти в лабораторию.
  4. Отправляемая на изучение питьевая вода должна сопровождаться соответствующими документами, в которых следует указать вид источника воды, откуда была отобрана проба, месторасположение источника, непосредственное место, где взята проба, дата и точное время взятия пробы.

mikrobiologichesky analiz vodyЛаборатория будет проводить микробиологический анализ природных вод по нескольким основным показателям.

Желательно проводить исследование питьевой воды ежегодно, особенно в период после весеннего паводка, а также после произошедших техногенных катастроф или природных катаклизмов, когда вероятность загрязнения подземных источников питьевой воды очень высока.

Лабораторией проводится комплексное исследование пробы воды в соответствии с методиками, которые рекомендованы нормативно-правовыми актами РФ, а также Международным комитетом по стандартизации.

Микробиологический анализ воды подразумевает как выявление микроорганизмов, но и обнаружение вирусов и бактерий, жизнедеятельность которых приводит к развитию инфекционных заболеваний у людей, употребляющих загрязненную воду.

Метод мембранной фильтрации – самый эффективный, результативный и надежный

В настоящее время одной из самых удобных, эффективных, надежных методик осуществления микробиологического анализа водопроводной, артезианской питьевой воды является метод мембранной фильтрации. Суть метода заключается в пропускании исследуемой воды через специальную фильтрующую установку, где размер ячеек не превышает 0,65 мкм.

mikrobiologichesky analiz

Присутствующие в воде болезнетворные микроорганизмы концентрируются на поверхности мембранного фильтра. После этого фильтр снимается и помещается в специальную среду, где происходит инкубирование микроорганизмов в созданных для них условиях.

Преимуществами методики мембранной фильтрации можно назвать:

  • высокоточный конечный результат исследования;
  • определение количества микроорганизмов;
  • результативность даже при наличии небольшого числа микроорганизмов в воде;
  • минимальные затраты рабочего времени;
  • быстрое получение результатов.

Для того, чтобы провести микробиологический анализ природных вод методом мембранной фильтрации, необходимо наличие вакуумного фильтра, а также специальных питательных сред – картонных подложек.

oskada.ru


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.

Adblock
detector